Identificação molecular, caracterização bioquímica e prospecção de metabólitos secundários produzidos por Photorhabdus sp.
| dc.contributor.advisor1 | Alves, Viviane Sandra | |
| dc.contributor.advisor1ID | https://orcid.org/0000-0003-2381-8115 | |
| dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/3794580975938452 | |
| dc.contributor.referee1 | Alves, Viviane Sandra | |
| dc.contributor.referee1ID | https://orcid.org/0000-0003-2381-8115 | |
| dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/3794580975938452 | |
| dc.contributor.referee2 | Lescano, Luis Eduardo Azevedo Marques | |
| dc.contributor.referee2ID | https://orcid.org/0000-0003-0874-9211 | |
| dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/0477576296995064 | |
| dc.contributor.referee3 | Ferreira, Dhiego Gomes | |
| dc.contributor.referee3ID | https://orcid.org/0000-0003-4375-6556 | |
| dc.contributor.referee3Lattes | http://lattes.cnpq.br/7326714947358202 | |
| dc.creator | Brito, Cássia de Fátima Pereira de | |
| dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/8959745406683169 | |
| dc.date.accessioned | 2024-10-30T17:49:14Z | |
| dc.date.available | 2024-10-30T17:49:14Z | |
| dc.date.issued | 2021 | |
| dc.description.abstract | Este trabalho teve como objetivo, identificar as bactérias simbiontes de quatro isolados de nematoides entomopatogênicos (NEPs) do gênero Heterorhabditis sp. (isolados UENP-n 04, 05, 06 e UEL 08), nativos do Norte do Paraná, e realizar a caracterização molecular, bioquímica e biológica destas bactérias, além de prospectar a capacidade de produção de metabólitos secundários com efeitos antimicrobianos, fungicidas e inseticidas. As bactérias foram isoladas a partir de hemolinfa de lagartas de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) e a identificação molecular foi feita a partir da amplificação de parte do gene rRNA 16S. Também foi feita a caracterização por meio de testes bioquímicos de motilidade, coloração de Gram, atividade de lipase, protease, lecitinase e bioluminescência e avaliada a produção de compostos com atividade antimicrobiana sobre as bactérias Bacillus thuringiensis, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. A patogenicidade sobre insetos foi avaliada em lagartas de G. mellonella, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) e Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) e o efeito fungicida sobre os fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana. Além disso, prospectou-se a produção de metabólitos secundários a partir de extratos, que foram avaliados quanto ao efeito inseticida sobre G. mellonella (aplicação oral e via hemolinfa), efeito antimicrobiano em bactérias S. aureus, E. coli, e B. thunringiensis e fungicida nos fungos M. anisopliae e B. bassiana. Três cepas bacterianas obtidas foram identificadas como pertencendo a espécie Photorhabdus luminescens (P05, P06 e L08) e a outra como Photorhabdus asymbiotica (P04). Quanto aos testes bioquímicos observou-se que todas as cepas foram positivas para motilidade, atividade lipase, protease e para absorção do azul de bromotimol, mas negativas para a atividade lecitinase. Quando inoculadas na hemolinfa de lagartas de G. mellonella, S. frugiperda e A. gemmatalis na forma de suspensão, as cepas foram altamente virulentas causando mortalidade acima de 85% nas três espécies de lagartas. Quando avaliadas em diferentes concentrações, P04 mostrou-se mais agressiva, matando acima de 95% das lagartas infectadas em todas as concentrações avaliadas após 18 horas de inoculação. Com relação ao efeito antimicrobiano, observou-se que as quatro cepas bacterianas apresentaram atividade positiva inibindo o crescimento de B. thuringiensis e S. aureus mas apenas P04 apresentou efeito antimicrobiano contra E. coli. O efeito dos extratos aquosos obtidos a partir das culturas de bactérias P04 apresentou resultados positivos para ação fungicida sobre B. bassiana e M. anisopliae e o extrato proveniente da cepa L08 apresentou efeito antimicrobiano sobre a bactéria S. aureus, porém não apresentaram efeito inseticida sobre G. mellonella quando inoculadas na hemolinfa ou quando ingeridas. | |
| dc.description.resumo | This study aimed to identify the symbiont bacteria of four isolates of entomopathogenic nematodes (NEPs) of the genus Heterorhabditis sp. (isolates UENP-n 04, 05, 06 and UEL 08), native to Northern Paraná, and to perform the molecular, biochemical and biological characterization of these bacteria, besides prospecting the production capacity of secondary metabolites with antimicrobial, fungicidal and insecticidal effects. The bacteria were isolated from the hemolymph of larvae of Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) and molecular identification was done by amplification of part of the 16S rRNA gene. It was also characterized by biochemical tests for motility, Gram staining, lipase, protease, lecithinase and bioluminescence activity and evaluated the production of antimicrobial on Bacillus thuringiensis, Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria. The pathogenicity on insects was evaluated on caterpillars of G. mellonella, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) and Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) and the fungicidal effect on the fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana. Furthermore, the production of secondary metabolites from extracts was prospected and evaluated for their insecticidal effect on G. mellonella (oral application and via hemolymph), antimicrobial effect on S. aureus, E. coli, and B. thunringiensis bacteria, and fungicidal effect on M. anisopliae and B. bassiana fungi. Three bacterial strains obtained were identified as belonging to Photorhabdus luminescens species (P05, P06 and L08) and the other as Photorhabdus asymbiotica (P04). As for the biochemical tests, all strains were positive for motility, lipase and protease activity, and bromothymol blue uptake, but negative for lecithinase activity. When inoculated into the hemolymph of G. mellonella, S. frugiperda and A. gemmatalis larvae as suspension, the strains were highly virulent, causing mortality above 85% in all three caterpillar species. When evaluated in different concentrations, P04 proved to be more aggressive, killing over 95% of the infected caterpillars in all concentrations evaluated after 18 hours of inoculation. Regarding the antimicrobial effect, it was observed that the four bacterial strains showed positive activity inhibiting the growth of B. thuringiensis, S. aureus but only P4 showed antimicrobial effect against E. coli. The effect of the aqueous extracts obtained from the bacterial cultures P04 showed positive results for fungicidal action on B. bassiana and M. anisopliae and the extract from the L08 strain showed antimicrobial effect on S. aureus bacteria, but showed no insecticidal effect on G. mellonella when inoculated in the hemolymph or when ingested. | |
| dc.description.sponsorship | Coordenadoria de Aperfeiçoamento de Pessoal de Ensino Superior (CAPES) | |
| dc.identifier.citation | BRITO, Cássia de Fátima Pereira de. Identificação molecular, caracterização bioquímica e prospecção de metabólitos secundários produzidos por Photorhabdus sp.. Orientadora: Viviane Sandra Alves. 2021. 86 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia) – Centro de Ciências Agrárias, Campus Luiz Meneghel, Universidade Estadual do Norte do Paraná, Bandeirantes, 2021. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.uenp.edu.br/handle/123456789/335 | |
| dc.language | por | |
| dc.publisher | Universidade Estadual do Norte do Paraná | |
| dc.publisher.country | Brasil | |
| dc.publisher.department | UENP/CLM::CCA | |
| dc.publisher.initials | UENP | |
| dc.publisher.program | PPAGRO | |
| dc.subject | Nematoides entomopatogênicos | |
| dc.subject | Bactéria simbionte | |
| dc.subject | Heterorhabditis amazonensis | |
| dc.subject | Heterorhabditis mexicana | |
| dc.subject.cnpq | Ciências Agrárias | |
| dc.subject.cnpq | Agronomia | |
| dc.subject.cnpq | Fitossanidade | |
| dc.subject.cnpq | Microbiologia Agrícola | |
| dc.title | Identificação molecular, caracterização bioquímica e prospecção de metabólitos secundários produzidos por Photorhabdus sp. | |
| dc.title.alternative | Molecular identification, biochemical characterization and prospection of secondary metabolites produced by Photorhabdus sp. | |
| dc.type | Dissertação |