Identificação molecular e caracterização morfológica doisolado de nematoide entomopatogênico Heterorhabditis sp. UENPn-01 obtido em área de pastagem no município de Ribeirão Claro, Paraná
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Data
2020-02-19
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Universidade Estadual do Norte do Paraná
Resumo
Nematoides são vermes pertencentes ao Filo Nematoda, que possuem hábitos diversificados,com grupos parasitas de plantas, parasitas humanos e há também os nematoides parasitas deinsetos, conhecidos como nematoides entomopatogênicos (NEPs). Os NEPs podem serencontrados em praticamente todo o mundo, sendo isolados de diferentes ecossistemas a partirde amostras de solo, ou de insetos infectados encontrados no campo, e no Brasil, existem aproximadamente 54 isolados registrados. No estado do Paraná, há registro de apenas umaespécie de nematoide entomopatogênico, Heterorhabditis amazonensis, demonstrando aimportância e a necessidade de conhecer melhor este grupo de entomopatógenos em nossoestado. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar a identificação e caracterização de umisolado de nematoide pertencente ao gênero Heterorhabditis sp., isolado no Município deRibeirão Claro, PR. A obtenção do isolado foi realizada através de coletas de solo, e utilizou-se a técnica de “iscas-vivas” com lagartas de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae). Aidentificação molecular do isolado de NEP foi realizada a partir da amplificação da região ITSe também da região D2D3, bem como, por meio de medição de estruturas para identificaçãomorfológica. Realizaram-se também fotos de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) paraanálise de estruturas morfológicas. Além disso, foi avaliada a patogenicidade sobre lagartas deG. mellonella e observação do ciclo de vida. No processo de identificação molecular a partir daregião ITS, observou-se similaridade de 98,64% com Heterorhabditis mexicana e 98,57% comHeterorhabditis taysearae, e na região D2D3 uma similaridade de 96,94% com H. mexicana.Com relação a identificação morfológica, observou-se que o isolado apresenta diferenças nasmedições quando comparado a H. mexicana, porém apresenta uma característica similar nosmachos no qual, o poro excretor é localizado posteriormente ao bulbo basal. Nas fotos de MEV,pode-se observar estruturas das fêmeas hermafroditas, fêmeas de segunda geração e machos,observando-se na região anterior, a presença das papilas labiais em todos os NEPs. Nas fêmeas,observa-se a vulva na região mediana do corpo, bem como a cauda e o ânus na região posterior.Nos machos, na parte posterior, nota-se a cauda e a espícula. No teste de patogenicidade, oisolado causou mortalidade de 88% de lagartas de G. mellonella, e quanto ao ciclo de vida oisolado UENPn-01 apresentou ciclo característico do gênero Heterorhabditis, com a primeirageração apenas de fêmeas hermafroditas, seguido de três gerações com a presença de machos efêmeas, totalizando quatro gerações completas dentro do hospedeiro.
Descrição
Palavras-chave
Controle biológico, Entomopatógeno, Análise molecular
Citação
Macedo, Mariana Ferracin de. Identificação molecular e caracterização morfológica doisolado de nematoide entomopatogênico Heterorhabditis sp. UENPn-01 obtido em área de pastagem no município de Ribeirão Claro, Paraná. Orientadora: Viviane Sandra Alves. 2020. 57 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia) – Centro de Ciências Agrárias, Universidade Estadual do Norte do Paraná, Bandeirantes, 2020.