Identificação molecular e caracterização morfológica doisolado de nematoide entomopatogênico Heterorhabditis sp. UENPn-01 obtido em área de pastagem no município de Ribeirão Claro, Paraná

Página do item simplificado
dc.contributor.advisor1Alves, Viviane Sandra
dc.contributor.advisor1IDhttps://orcid.org/0000-0003-2381-8115
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/3794580975938452
dc.contributor.referee1Alves, Viviane Sandra
dc.contributor.referee1IDhttps://orcid.org/0000-0003-2381-8115
dc.contributor.referee1Latteshttp://lattes.cnpq.br/3794580975938452
dc.contributor.referee2Guide, Bruna Aparecida
dc.contributor.referee2IDhttps://orcid.org/0000-0002-3988-606X
dc.contributor.referee2Latteshttp://lattes.cnpq.br/7288306329944786
dc.contributor.referee3Ferreira, Dhiego Gomes
dc.contributor.referee3IDhttps://orcid.org/0000-0003-4375-6556
dc.contributor.referee3Latteshttp://lattes.cnpq.br/7326714947358202
dc.creatorMacedo, Mariana Ferracin de
dc.creator.IDhttps://orcid.org/0000-0002-8589-8133
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/2058635605960476
dc.date.accessioned2025-02-28T17:48:20Z
dc.date.available2025-02-28T17:48:20Z
dc.date.issued2020-02-19
dc.description.abstractNematoides são vermes pertencentes ao Filo Nematoda, que possuem hábitos diversificados,com grupos parasitas de plantas, parasitas humanos e há também os nematoides parasitas deinsetos, conhecidos como nematoides entomopatogênicos (NEPs). Os NEPs podem serencontrados em praticamente todo o mundo, sendo isolados de diferentes ecossistemas a partirde amostras de solo, ou de insetos infectados encontrados no campo, e no Brasil, existem aproximadamente 54 isolados registrados. No estado do Paraná, há registro de apenas umaespécie de nematoide entomopatogênico, Heterorhabditis amazonensis, demonstrando aimportância e a necessidade de conhecer melhor este grupo de entomopatógenos em nossoestado. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar a identificação e caracterização de umisolado de nematoide pertencente ao gênero Heterorhabditis sp., isolado no Município deRibeirão Claro, PR. A obtenção do isolado foi realizada através de coletas de solo, e utilizou-se a técnica de “iscas-vivas” com lagartas de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae). Aidentificação molecular do isolado de NEP foi realizada a partir da amplificação da região ITSe também da região D2D3, bem como, por meio de medição de estruturas para identificaçãomorfológica. Realizaram-se também fotos de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) paraanálise de estruturas morfológicas. Além disso, foi avaliada a patogenicidade sobre lagartas deG. mellonella e observação do ciclo de vida. No processo de identificação molecular a partir daregião ITS, observou-se similaridade de 98,64% com Heterorhabditis mexicana e 98,57% comHeterorhabditis taysearae, e na região D2D3 uma similaridade de 96,94% com H. mexicana.Com relação a identificação morfológica, observou-se que o isolado apresenta diferenças nasmedições quando comparado a H. mexicana, porém apresenta uma característica similar nosmachos no qual, o poro excretor é localizado posteriormente ao bulbo basal. Nas fotos de MEV,pode-se observar estruturas das fêmeas hermafroditas, fêmeas de segunda geração e machos,observando-se na região anterior, a presença das papilas labiais em todos os NEPs. Nas fêmeas,observa-se a vulva na região mediana do corpo, bem como a cauda e o ânus na região posterior.Nos machos, na parte posterior, nota-se a cauda e a espícula. No teste de patogenicidade, oisolado causou mortalidade de 88% de lagartas de G. mellonella, e quanto ao ciclo de vida oisolado UENPn-01 apresentou ciclo característico do gênero Heterorhabditis, com a primeirageração apenas de fêmeas hermafroditas, seguido de três gerações com a presença de machos efêmeas, totalizando quatro gerações completas dentro do hospedeiro.
dc.description.resumoNematodes are worms belonging to the Phylum Nematoda, which have diversified habits, withparasitic groups of plants, human parasites and also insect parasitic nematodes, known asentomopathogenic nematodes (NEPs). NEPs can be found practically all over the world, beingisolated from different ecosystems from soil samples, or from infected insects found in the field,and in Brazil, there are approximately 54 registered isolates. In the state of Paraná, there is onlyone species of entomopathogenic nematode, Heterorhabditis amazonensis, showing theimportance and the need to better understand this group of entomopathogens in our state. Thus,the objective of this work was to identify and characterize a nematode isolate belonging to thegenus Heterorhabditis sp., Isolated in the city of Ribeirão Claro, PR. The isolation was obtainedby collecting soil, and the technique of "live baits" with caterpillars of Galleria mellonella(Lepidoptera: Pyralidae) was used. The molecular identification of the NEP isolate was carriedout by amplifying the ITS region and also the D2D3 region, as well as by measuring structuresfor morphological identification. Scanning Electron Microscopy (SEM) photos were also takento analyze morphological structures. In addition, the pathogenicity of G. mellonella caterpillarsand observation of the life cycle were evaluated. In the molecular identification process fromthe ITS region, 98.64% similarity was observed with Heterorhabditis mexicana and 98.57%with Heterorhabditis taysearae, and in the D2D3 region, 96.94% similarity with H. mexicana.Regarding the morphological identification, it was observed that the isolate presents differencesin measurements when compared to H. mexicana, however it has a similar characteristic inmales in which the excretory pore is located posteriorly to the basal bulb. In the SEM photos,it is possible to observe structures of the hermaphroditic females, second generation femalesand males, observing the presence of the labial papillae in all NEPs in the anterior region. Infemales, the vulva is observed in the median region of the body, as well as the tail and anus inthe posterior region. In males, in the posterior part, the tail and spike can be noticed. In thepathogenicity test, the isolate caused 88% mortality of G. mellonella caterpillars, and as for thelife cycle, the UENPn-01 isolate presented a cycle characteristic of the genus Heterorhabditis,with the first generation of hermaphrodite females only, followed by three generations with thepresence of males and females, totaling four complete generations within the host.
dc.description.sponsorshipCAPES
dc.identifier.citationMacedo, Mariana Ferracin de. Identificação molecular e caracterização morfológica doisolado de nematoide entomopatogênico Heterorhabditis sp. UENPn-01 obtido em área de pastagem no município de Ribeirão Claro, Paraná. Orientadora: Viviane Sandra Alves. 2020. 57 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia) – Centro de Ciências Agrárias, Universidade Estadual do Norte do Paraná, Bandeirantes, 2020.
dc.identifier.urihttps://repositorio.uenp.edu.br/handle/123456789/454
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Estadual do Norte do Paraná
dc.publisher.countryBrasil
dc.publisher.departmentUENP/CLM::CCA
dc.publisher.initialsUENP
dc.publisher.programPPAGRO
dc.subjectControle biológico
dc.subjectEntomopatógeno
dc.subjectAnálise molecular
dc.subject.cnpqAgronomia
dc.subject.cnpqCiências Agrárias
dc.titleIdentificação molecular e caracterização morfológica doisolado de nematoide entomopatogênico Heterorhabditis sp. UENPn-01 obtido em área de pastagem no município de Ribeirão Claro, Paraná
dc.typeDissertação
Arquivos
Coleções
Dissertações