Programa de Pós-Graduação em Agronomia

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Navegando Programa de Pós-Graduação em Agronomia por Autor "Alves, Viviane Sandra"

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    Aspectos biológicos de Agrotis ipsilon (Hufnagel, 1767) (Lepidoptera: Noctuidae) e testes com nematoides entomopatogênicos (Rhabditida: Steinernematidae e Heterorhabditidae) visando o seu controle
    (Universidade Estadual do Norte do Paraná, 2014-04-16) Giannasi, Andréia de Oliveira; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Ringenberg, Rudiney; https://orcid.org/0000-0002-0906-5535; http://lattes.cnpq.br/3610407592944170; Mihsfeldt, Laila Herta; https://orcid.org/0000-0001-6619-8652; http://lattes.cnpq.br/5443619889613070; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452
    A lagarta-rosca, Agrotis ipsilon (Lepidoptera: Noctuidae) é uma praga de importância econômica em várias culturas, inclusive milho (Zea mays) podendo chegar à perda potencial de 20%. A ausência de informações sobre seu impacto em milho motivou a comparação de sua biologia, nas fases larval e pupal com dieta artificial e natural (folha de milho). Nematoides entomopatogênicos (NEPs) apresentam juntamente com bactérias uma associação simbionte que consegue controlar insetos. Os juvenis infectivos de nematoides dos gêneros Steinernema e Heterorhabditis buscam seus hospedeiros no solo e, quando os encontram, penetram em suas aberturas naturais ou perfuram sua cutícula matando o inseto em até 48 horas. Em laboratório, lagartas foram individualizadas e alimentadas com dieta artificial e folha de milho diariamente, para avaliar os parâmetros biológicos de duração e viabilidade dos instares larvais, duração total e individual de cada instar larval e pupa, razão sexual, deformação, massa de lagartas e pupas, consumo e utilização do alimento. Foi feito também a seleção em laboratório de isolados de NEPs utilizando nove isolados, sendo eles: Heterorhabditis amazonensis (RSC05); Heterorhabditis indica (IBCB-n05); H. sp. (JPM4), H. sp. (IBCB-n40); H. sp. (NEPET 11); H. sp. (IBCB-n44); H. sp. (Alho); Steinernema carpocapsae (IBCB-n02) e S. sp. (CH3). Também foi realizado teste com diferentes estágios nas fases larvais e pupa, teste de diferentes concentrações (0 – testemunha, 50 JIs/cm2, 100 JIs/cm2, 150 JIs/cm2e 200 JIs/cm2) de NEPs e produção in vivo em lagartas de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) com isolados IBCB-n02, IBCB-n05 e Alho, onde no teste de seleção e concentração foram utilizados lagartas de 3º instar de A. ipsilon e teste em casa de vegetação. Na biologia de vida, as lagartas que foram alimentadas com folha de milho tiveram uma maior duração larval e maior deformidade em pupas e adultos, e as lagartas alimentadas com dieta artificial tiveram maior viabilidade de lagartas e pupas e menor duração larval, lagartas alimentadas com dieta artificial ingeriram mais alimento, produziram mais fezes, tiveram maior ganho de peso e metabolizaram mais alimento. Na seleção somente o isolado NEPET 11 não alcançou mortalidade eficiente (10%), o que diferiu do restante que foi superior a 80%, chegando a 100% com o isolado CH3. No teste com diferentes estágios nas fases larvais e fase de pupa nenhum isolado alcançou maior mortalidade quando comparadas com lagartas do 3º instar, nas diferentes concentrações de NEPs, o isolado Alho alcançou 10% de mortalidade para a concentração de 50 JIs/cm2 e o isolado IBCB-n05 alcançou 100% de mortalidade na concentração de 200 JIs/cm2. No teste de produção in vivo o isolado Alho apresentou a maior produção que foi de 112.138 JIs/lagarta de G. mellonella. Na casa de vegetação o isolado IBCB-n02 causou maior mortalidade diferindo da testemunha. Os resultados observados neste trabalho mostram que diferentes isolados de NEPs possuem infectividade eficiente em laboratório (maior que 80%) para a utilização em programas de controle biológico de A. ipsilon.
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    Avaliação da produção in vivo, alternativas de meio de cultura e diferentes concentrações de inóculo para produção in vitro de Heterorhabditis amazonensis (Isolado UEL 08)
    (Universidade Estadual do Norte do Paraná, 2022) Doneze, Gabriela Souza; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Matsumoto, Leopoldo Sussumu; https://orcid.org/0000-0001-5102-545X; http://lattes.cnpq.br/0857955043436449; Alves, Luis Francisco Angeli; https://orcid.org/0000-0002-3102-764X; http://lattes.cnpq.br/0613029292752945
    Nematoides Entomopatogênicos (NEP) são parasitas obrigatórios que possuem associação com bactérias simbiônticas e causam mortalidade em insetos, por isso, são considerado ótimos agentes no controle biológico. Produtos à base de NEP são uma realidade fora do Brasil, mas aqui, ainda são escassos devida a dificuldade de produção em larga escala. Por outro lado, o isolado nativo Heterorhabditis amazonensis (UEL 08) foi avaliado como um agente potencial para uso no controle do cascudinho de aviário, Alphitobius diaperinus (Coleoptera: Tenebrionidae). Embora os testes de patogenicidade e virulência sobre o inseto indicarem que este é um isolado promissor, não há evidências de que ele possa ser produzido em larga escala e assim, utilizado no controle dessa praga. Diante disso, este trabalho teve como objetivo, realizar testes de produção in vivo e in vitro do isolado UEL 08. Para o teste in vivo foram utilizadas larvas de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae) como hospedeiro e avaliou-se a produção por larva, por grama de larva e produção total. A produção in vitro foi avaliada utilizando meios sólido e semi-sólido, contendo diferentes fontes de gordura (óleo de milho, canola, algodão, soja, coco, gordura de porco e manteiga de leite bovino). Posteriormente, foram avaliados diferentes concentrações de inóculo (1.000, 2.500. 5.000, 7.500 e 10.000 Juvenis Infectantes (JIs)/frasco). Os ensaios foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições para cada tratamento. No ensaio de produção in vivo observou-se produção de 6,5×104JIs/larva e produção total de 6,5x105 JIs/repetição. Na produção in vitro em meio sólido, houve diferença entre as fontes de gordura utilizadas, sendo o óleo de milho a que proporcionou maior produção com 926,5 JIs/mL de meio. Em meio semi-sólido, o óleo de milho também apresentou a melhor produção, com 3,2x104 JIs/mL diferindo de todas as outras fontes de gordura avaliadas. Os JIs produzidos tanto em meio sólido, quanto em semi-sólido foram virulentos quando aplicados sobre larvas de G. mellonella, com valores de mortalidade que aproximaram se de 100%. A melhor concentração de inóculo em meio semi-sólido foi de 1.000JIs/frasco.
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    Bases biológicas de Trichogramma pretiosum (Riley, 1879) (Hymenoptera: trichogrammatidae) e nematoides entomopatogênicos sobre Rachiplusia nu (Guenée, 1852) (Lepidoptera: noctuidae) na cultura da soja
    (Universidade Estadual do Norte do Paraná, 2024) Andrade, Nathália Costalonga; Bueno, Adeney de Freitas; https://orcid.org/0000-0002-5462-5845; http://lattes.cnpq.br/7329418125245335; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Silva, Gabriela Vieira; https://orcid.org/0000-0002-6432-0391; http://lattes.cnpq.br/6593862082231188; Carvalho, Vanessa Andalo Mendes de; https://orcid.org/0000-0002-6310-1680; http://lattes.cnpq.br/8132224406035792; Bueno, Adeney de Freitas; https://orcid.org/0000-0002-5462-5845; http://lattes.cnpq.br/7329418125245335
    O Brasil é considerado o maior produtor mundial de soja (Glycine max) e conta com altos níveis de utilização de soja Bt, que fornece controle sobre diversas lagartas que atacam esta cultura, como a espécie Rachiplusia nu (Guenée, 1852) (Lepidoptera: Noctuidae). Contudo, a ocorrência desta espécie tem sido relatada em alguns estados brasileiros em soja Bt (Cry1Ac) o que pode indicar resistência, aumentando sua importância como inseto praga. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar as bases biológicas de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) e de nematoides entomopatogênicos (NEP) dos gêneros Heterorhabditis e Steinernema visando o controle de R. nu, separadamente. Para isso, foram realizados testes com o parasitoide T. pretiosum avaliando suas características biológi cas e capacidade de parasitismo em ovos de R. nu nas temperaturas 20, 25 e 30ºC. Os parâmetros avaliados nos testes de biologia foram: duração do desenvolvimento (ovo-adulto); por centagem de emergência (viabilidade); número de indivíduos por ovo e razão sexual. Foi também avaliada a capacidade de parasitismo nas mesmas temperaturas, e foram observados os parâmetros biológicos: número de ovos parasitados diariamente; porcentagem acumulada de parasitismo; número total de ovos parasitados por fêmea e longevidade das fêmeas. Para os NEP, foram realizados experimentos de seleção dos isolados (patogenicidade e virulência), eficiência de diferentes concentrações (0, 25, 50, 75 e 100 JI/cm2) e ensaios sobre produção (produção total, produção por lagarta, produção por grama de lagarta de R. nu). Quanto aos dados referentes a ação do parasitoide, nos experimentos sobre a biologia, os parâmetros por centagem de emergência e número de parasitoide por ovo não foram afetados pelas condições estudadas. Já na razão sexual, os resultados obtidos a 25 e 30ºC e a duração do desenvolvi mento (ovo-adulto) apresentou diferença entre as três temperaturas. Nos bioensaios sobre ca pacidade, o ritmo de parasitismo de T. pretiosum foi diretamente influenciado pelas tempera turas, e a longevidade foi maior à medida que a temperatura decresceu enquanto a porcenta gem acumulada de parasitismo variou de 6 a 10 dias, da maior temperatura para a menor, res pectivamente. O maior número de ovos parasitados foi 46 ovos por fêmea. Já como resultado da seleção de NEP foram selecionados os isolados UEL07 e UENP06, ambos Heterorhabditis amazonenses, que apresentaram mortalidade de 100% em R. nu. Em todas as concentrações os nematoides foram patogênicos sobre R. nu, com resultados de 98 a 100% de mortalidade na maior concentração utilizada para os isolados UENP 06 e UEL07, respectivamente. Por fim, a produção média total de NEP foi de 2,9 x 104 para UENP 06 e 3,9 x 104para UEL 07.
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    Identificação molecular, caracterização bioquímica e prospecção de metabólitos secundários produzidos por Photorhabdus sp.
    (Universidade Estadual do Norte do Paraná, 2021) Brito, Cássia de Fátima Pereira de; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Alves, Viviane Sandra; https://orcid.org/0000-0003-2381-8115; http://lattes.cnpq.br/3794580975938452; Lescano, Luis Eduardo Azevedo Marques; https://orcid.org/0000-0003-0874-9211; http://lattes.cnpq.br/0477576296995064; Ferreira, Dhiego Gomes; https://orcid.org/0000-0003-4375-6556; http://lattes.cnpq.br/7326714947358202
    Este trabalho teve como objetivo, identificar as bactérias simbiontes de quatro isolados de nematoides entomopatogênicos (NEPs) do gênero Heterorhabditis sp. (isolados UENP-n 04, 05, 06 e UEL 08), nativos do Norte do Paraná, e realizar a caracterização molecular, bioquímica e biológica destas bactérias, além de prospectar a capacidade de produção de metabólitos secundários com efeitos antimicrobianos, fungicidas e inseticidas. As bactérias foram isoladas a partir de hemolinfa de lagartas de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) e a identificação molecular foi feita a partir da amplificação de parte do gene rRNA 16S. Também foi feita a caracterização por meio de testes bioquímicos de motilidade, coloração de Gram, atividade de lipase, protease, lecitinase e bioluminescência e avaliada a produção de compostos com atividade antimicrobiana sobre as bactérias Bacillus thuringiensis, Staphylococcus aureus e Escherichia coli. A patogenicidade sobre insetos foi avaliada em lagartas de G. mellonella, Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) e Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) e o efeito fungicida sobre os fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana. Além disso, prospectou-se a produção de metabólitos secundários a partir de extratos, que foram avaliados quanto ao efeito inseticida sobre G. mellonella (aplicação oral e via hemolinfa), efeito antimicrobiano em bactérias S. aureus, E. coli, e B. thunringiensis e fungicida nos fungos M. anisopliae e B. bassiana. Três cepas bacterianas obtidas foram identificadas como pertencendo a espécie Photorhabdus luminescens (P05, P06 e L08) e a outra como Photorhabdus asymbiotica (P04). Quanto aos testes bioquímicos observou-se que todas as cepas foram positivas para motilidade, atividade lipase, protease e para absorção do azul de bromotimol, mas negativas para a atividade lecitinase. Quando inoculadas na hemolinfa de lagartas de G. mellonella, S. frugiperda e A. gemmatalis na forma de suspensão, as cepas foram altamente virulentas causando mortalidade acima de 85% nas três espécies de lagartas. Quando avaliadas em diferentes concentrações, P04 mostrou-se mais agressiva, matando acima de 95% das lagartas infectadas em todas as concentrações avaliadas após 18 horas de inoculação. Com relação ao efeito antimicrobiano, observou-se que as quatro cepas bacterianas apresentaram atividade positiva inibindo o crescimento de B. thuringiensis e S. aureus mas apenas P04 apresentou efeito antimicrobiano contra E. coli. O efeito dos extratos aquosos obtidos a partir das culturas de bactérias P04 apresentou resultados positivos para ação fungicida sobre B. bassiana e M. anisopliae e o extrato proveniente da cepa L08 apresentou efeito antimicrobiano sobre a bactéria S. aureus, porém não apresentaram efeito inseticida sobre G. mellonella quando inoculadas na hemolinfa ou quando ingeridas.